Forskjell mellom nitrocellulose og nylonmembran | Nitrocellulose vs Nylon Membrane
Nøkkelforskjell - Nitrocellulose vs Nylon Membrane
Blotting er en viktig teknikk for påvisning av spesifikke sekvenser av DNA, RNA og proteiner fra deres blandinger i molekylærbiologi. Det er gjort ved hjelp av en membran kalt blot. Det er forskjellige blotting teknikker som nordlige, sørlige og vestlige blotting. Velge en skikkelig membran for blottingprosessen bør forsiktig gjøres for å forhindre uspesifikke bindinger og feiloppdagelser. Nitrocellulose, nylon og PVDF er vanlige membraner i blottingsteknikker. De har forskjellige egenskaper. Nøkkelforskjellen mellom nitrocellulose og nylonmembran er at nitrocellulose membraner har et høyt protein immobiliseringspotensial mens nylonmembraner har høyt nukleinsyre immobiliseringspotensial. Imidlertid brukes begge typer membraner ofte i blottingsteknikker.
INNHOLD
en. Oversikt og nøkkelforskjell
2. Hva er et nitrocellulosemembran
3. Hva er et nylonmembran
4. Side ved side-sammenligning -Nitrocellulose vs Nylon Membrane
5. Sammendrag
Hva er et Nitrocellulose Membran?
Nitrocellulose membran er et vanlig membranfilter i nukleinsyre og protein blotting teknikker. Det har et høyt proteinbindingspotensiale. Derfor er nitrocellulose membraner mye brukt i western blotting teknikk. Nitrocellulose membraner er kompatible med alle hybridiseringsteknikker og viser overlegne bindingsegenskaper uten forstyrrelser. Nitrocellulose membraner er naturlig hydrofile i naturen. De gjør hydrofile samspill med molekyler og effektivt immobiliserer dem på membranen. Kommersielle nitrocellulose membraner er tilgjengelige i to porestørrelser: 0. 45 og 0. 2 μm.
Figur 01: Nitrocellulose membran som brukes i western blotting
Hva er et nylonmembran?
Nylonmembran er en annen type kommersiell membran som brukes i blottingsteknikker. Det brukes alternativt med nitrocellulose membraner for sørlige og nordlige blotting. Nylon membraner er ideelle for southern blotting enn nitrocellulose på grunn av deres høye affinitet til binding med DNA. På grunn av flere unike egenskaper av nylonmembraner, bruker forskere ofte nylonmembraner for sydlig og nordlig blotting i stedet for over nitrocellulose-membran. Nylonmembraner anbefales også til stripping og reprobing, i motsetning til nitrocellulose.
Figur 02: Nylonmembran brukt til sydlig blotting
Hva er forskjellen mellom nitrocellulose og nylonmembran?
- diff Artikkel Mellom før Tabell ->
Nitrocellulose vs Nylon Membran |
|
| Nitrocellulose membraner er sprø. | Nylonmembraner er mindre sprø. |
| Håndtering | |
| De er vanskelige å håndtere. | De er enkle å håndtere. |
| Reprobing | |
| Ikke-støttede nitrocellulose membraner er vanskelig å reprobe. | Reprobing er enkelt med nylonmembraner. |
| Kompatibilitet med ulike lagringsforhold | |
| Nitrocellulose membraner har mindre styrke til å motstå forskjellige lagringsforhold. | Nylonmembraner svarer mer robust til ulike lagringsforhold. |
| Bruk | |
| Prewetting er nødvendig. | Forvetting er ikke nødvendig for nylonmembraner. |
| Hydrofil Nature | |
| Nitrocellulose membraner er hydrofile, men er mindre hydrofile enn nylon membraner. | De er svært hydrofile i naturen. |
| Immobiliseringspotensial | |
| Nitrocellulose membraner har mindre affinitet for nukleinsyrer. Men det har en høy affinitet for proteiner. | Nylonmembraner har høyt bindingspotensiale med nukleinsyrer enn nitrocellulose membraner. |
Sammendrag - Nitrocellulose vs Nylon Membrane
Nitrocellulose og nylonmembraner er spesialark som brukes i blottingsteknikk for å reprodusere båndmønsteret på gelen. De muliggjør muligheten til å oppdage en bestemt sekvens eller et protein fra blandingene ved å immobilisere dem på membranen. Når molekylene er immobilisert på membranen, kan den brukes som et substrat for hybridiseringsanalyse med merkede prober. Nitrocellulosemembranen brukes ofte til proteinpåvisning i western blotting-teknikk på grunn av sin høybindingsaffinitet med proteiner. Nylonmembraner brukes ofte til sørlige og nordlige blotting. Dette er forskjellen mellom nitrocellulose og nylonmembran.
Referanser:
1. Hayes, P.C., C.R. Wolf og J.D. Hayes. "Blotting teknikker for studier av DNA, RNA, og proteiner. "BMJ: British Medical Journal. U. S. National Library of Medicine, 14. oktober 1989. Web. 07. april 2017
2. Mahmood, Tahrin og Ping-Chang Yang. "Western Blot: Teknikk, teori og problemløsing. "Nord-American Journal of Medical Sciences. Medknow Publications & Media Pvt Ltd, september 2012. Web. 07. april 2017
Image Courtesy:
1. "Western blot transfer" Av Bensaccount på engelsk Wikipedia (CC BY 3. 0) via Commons Wikimedia
