Forskjellen mellom Kapillær elektroforese og Gel elektroforese | Kapillærelektroforese vs gelelektroforese
Tast Differanse - kapillære elektroforese vs gelelektroforese
elektroforese er en teknikk som brukes til å separere biomolekyler basert på partikkelladning, partikkelstørrelse, og partikkelformen. Vandringen av molekylet, kjent som elektroforetisk mobilitet , avhenger av typen av polymer / gel anvendes, dets porestørrelse, med spenningen som, gangtid og den flate i forhold til volum. Det finnes forskjellige typer elektroforese teknikker basert på hvilken type biomolekyl som brukes. Den første typen elektroforese oppfunnet var papirelektroforese hvor et nitrocellulosepapir ble brukt som medium for separasjon av biomolekyler. Prinsippet om gelelektroforese hvor forskjellige porestørrelsesgeler ble brukt til å separere biomolekyler, ble oppfunnet senere. Gelelektroforese teknikk ble ytterligere modifisert for å forbedre nøyaktigheten av teknikken, og en slik modifikasjon er kapillærelektroforese. Hovedforskjellen mellom kapillær elektroforese og gel-elektroforese er at gelelektroforese utføres i et vertikalt eller horisontalt plan ved hjelp av en polymer gel av standard porestørrelse mens kapillær elektroforese blir utført i et kapillarrør med en polymer væske eller en gel.
INNHOLD
en. Oversikt og nøkkelforskjell
2. Hva er Gel Electrophoresis
3. Hva er kapillærelektroforese
4. Likheter mellom kapillærelektroforese og gelelektroforese
5. Side ved side-sammenligning - kapillærelektroforese vs gelelektroforese i tabellform
6. Sammendrag
Hva er Gel Electrophoresis?
Gelelektroforese er en teknikk som brukes til å separere hovedsakelig nukleinsyrer, proteiner eller aminosyrer basert på dets ladning, størrelse og form. Denne teknikken bruker en fysisk gel, som er en polymer substans, som separasjonsmedium. Mest brukte geler er agarose (for nukleinsyreseparasjon) og polyakrylamid (for proteinseparasjon). Gelen elektroforeseapparatur inneholder gelen støpe skuffen for å fremstille gelen, støping kammer for å forberede brønner, buffertank, elektroder - positiv (anode) og negativ (katode) og spenningsforsyningen.Molekyler som DNA eller RNA, som er negativt ladet, beveger seg fra katoden til anoden og molekylene som er positivt ladet bevege seg omvendt. Gelpreparering gjøres i henhold til kravet. Hvis det kreves høy oppløsning eller separasjon av molekyler, bør en høy konsentrasjonsgel med en mindre porestørrelse fremstilles. Molekylene separert på gelmatrisen observeres etter en fargingsteknikk. De separerte molekylene vises som bånd på gelmatrisen.
Figur 2: Gelektroforese
Gelelektroforese brukes i molekylær diagnostikk, for eksempel DNA-fingeravtrykk for å bestemme tilstedeværelsen av et bestemt DNA / RNA-fragment eller et protein. Gelelektroforese bestemmer også renheten av den ekstraherte biomolekylprøven. Gelelektroforese utføres som et foreløpig trinn for inn og hybridisering og som en bekreftende analyse etter sekvensering.
Kapillærelektroforese er en modifikasjon av gelelektroforese som bruker det samme separasjonsprinsippet basert på ladning, molekylets størrelse, men utføres i et kapillærrør med enten et gelstoff eller en flytende polymer. Kapillærene er fremstilt av kondensert silisiumdioksyd, og hvert kapillærrør har en indre diameter på 50-100 pm og er 25-100 cm i lengde. Prøver injiseres i kapillærrøret inneholdende polymermaterialet og separeres meget raskt enn den konvensjonelle gelelektroforese. Kapillærsystemet er godt beskyttet inne i en isolatorjakke som beskytter prøven mot forurensning. Kapillærer kan fylles med flytende polymerer som hydroksyetylcellulose eller høyoppløselige geler, så som polyakrylamid. Kapillærelektroforese gir større oppløsning; Derfor er adskillelse mer nøyaktig. Kapillærelektroforese bruker et automatisert detektorsystem via spektrofotometrisk analyse. Dette skyldes høyere overflateareal til volumforhold.
Figur 02: Kapillærelektroforese
Kapillærelektroforese brukes i situasjoner som for rettsmedisin hvor høyere nøyaktighet kreves og er ikke vanlig brukt som kostbar teknikk.
Hva er likhetene mellom kapillærelektroforese og gelelektroforese?
Separasjon av molekyler i begge teknikkene er basert på molekylets ladning og størrelse.
- Begge teknikkene kan brukes til å separere både nukleinsyrer og proteiner.
- Prøvevolumet av begge teknikkene er det samme.
- Begge teknikkene bruker en buffer for å lette separasjonen.
- Hva er forskjellen mellom kapillærelektroforese og gelelektroforese?
- diff Artikkel Mellom før Tabell ->
Kapillærelektroforese vs Gelelektroforese
Kapillærelektroforese er en teknikk som separerer biomolekyler på et kapillærrør ved bruk av et væske- eller gelpolymermedium. |
|
| Gelelektroforese er en teknikk som separerer biomolekyler på et vertikalt eller horisontalt plan ved bruk av et polymergelmedium. | Separasjon |
| I kapillærelektroforese blir separering gjort inne i et kapillærrør. | |
| Ved gelelektroforese blir separering gjort på et vertikalt eller horisontalt plan. | Mellom separasjon |
| Flytende polymerer som hydroksyetylcellulose brukes i kapillærelektroforese. | |
| Geler, enten agarose eller polyakrylamid, brukes som et medium i gelelektroforese. | Korskobling |
| Høy oppløsning kan fås fra kapillærelektroforese. | |
| Oppløsningen er lav i gelelektroforese. | Overflateområde til volumforhold |
| Forholdet mellom volum og volum er høyt i kapillærelektroforese. | |
| Forholdet mellom volum og volum er lavt i gelelektroforese. | Deteksjonsteknikk |
| Deteksjon skjer via spektrofotometriske automatiserte detektorer i kapillærelektroforese. | |
| Farging og observasjon gjennom UV-transilluminator er gjort som detekteringsteknikker i gelelektroforese. | Sammendrag - Capillary Electrophoresis vs Gel Electrophoresis |
Molekylær diagnostikk spiller en viktig rolle i den vitenskapelige verden. Identifikasjon og rensing av DNA, RNA og Proteiner er kritiske trinn i diagnostiske prosedyrer. Elektroforese er en teknikk som separerer og identifiserer biomolekyler i både gelelektroforese og den meget avanserte kapillærgelelektroforese. Gelelektroforese utføres i et vertikalt eller horisontalt plan ved bruk av en polymergel med standard porestørrelse mens kapillærelektroforese utføres i et kapillærrør med en polymervæske eller en gel. Dette er forskjellen mellom kapillær elektroforese og gelelektroforese. Ved fullføring av elektroforese teknikken behandles biomolekylene videre for å oppnå høyere nivåinformasjon via hybridisering eller gjennom teknikker som fingeravtrykk.
Last ned PDF-versjonen av kapillærelektroforese vs gelelektroforese
Du kan laste ned PDF-versjonen av denne artikkelen og bruke den til nettbaserte formål som per sitatnotat. Vennligst last ned PDF-versjon her Forskjellen mellom Gel Electrophoresis og Capillary Electrophoresis.
Referanser:
1. Durney, Brandon C., et al. "Kapillærelektroforese anvendt på DNA: bestemme og utnytte sekvens og struktur for å fremme bioanalyser (2009-2014). "Analytisk og bioanalytisk kjemi, Springer Berlin Heidelberg, 2015, Tilgjengelig her. Tilgang 28. august 2017.
2. “Elektroforese. "University of Leicester, 8. januar 2009, Tilgjengelig her. Tilgang 28. august 2017.
3. "Gel elektroforese. "Khan Academy, tilgjengelig her. Tilgang 28. august 2017.
Bilde Courtesy:
1. "DNA-agarosegelelektroforese" ved naturkurs fra Ann Arbor - DNA-lab (CC BY 2. 0) via Commons Wikimedia
2. "Capillary Gel Electrophoresis Instrument Schematic" Av Chem4066sp13 - Eget arbeid (CC BY-SA 3. 0) via Commons Wikimedia
