Forskjell mellom YAC og M13 Phage Vector | YAC vs M13 Phage Vector

Nøkkelforskjell - YAC vs M13 Fagvektor

DNA-kloning er en viktig prosess som muliggjør forplantning av viktige DNA-fragmenter av organismer. Det krever sammenføring av spesifikt DNA med vektor-DNA for å danne rekombinant DNA som transformerer til vertsorganismen. En vektor er et DNA-molekyl som oppfører seg som et kjøretøy for å bære fremmed genetisk materiale inn i en annen celle eller organisme. Den skal kunne replikere inne i vertsorganismen og produsere flere kopier av rekombinant DNA. Det finnes ulike typer vektorer brukt i DNA-kloning. Gjær kunstig kromosom (YAC) og M13 fagvektor er to typer blant dem. Hovedforskjellen mellom YAC og M13 fagvektoren er at YAC er et kunstig kromosom som replikerer i gjærceller mens M13 fagvektoren er et enkeltstrenget sirkulært DNA av bakteriofag M13 som replikerer i E coli celler.

INNHOLD

en. Oversikt og nøkkelforskjell

2. Hva er YAC

3. Hva er M13 Phage Vector

4. Side ved side-sammenligning - YAC vs M13-fagvektor

5. Sammendrag

Hva er en YAC Vector?

YAC er et kunstig konstruert kromosom som har evnen til å bære et stort segment av fremmed DNA og replikere i gjærcellene. Den har sentromere, telomer og autonomt replikerende sekvenser avgjørende for replikasjon og stabilitet. YAC skal også bære en selektiv markør eller markører og restriksjonsseter for å gjøre den til en effektiv kloningsvektor. Store sekvenser fra 1000 kb til 2000 kb kan settes inn i YAC og overføres til gjær.

Figur 01: YAC Vector

Hva er M13 Phage Vector?

Bakteriofag M13 er et virus som infiserer og replikerer i E Coli. Genomet av M13 bakteriofagen er liten i størrelse, ca 6,7 kb. Det er et enkeltstrenget, sirkulært og positivt sans DNA. Dette viruset infiserer spesifikt E Coli bakterier gjennom F pilus. Når den kommer inn i ssDNA i bakterien, syntetiserer den dens komplementære streng og blir dsDNA eller replikativ form (RF) av M13. RF kan oppføre seg som et plasmid i vertsorganismen. DsDNA replikerer innenfor E Coli og produserer ssDNA som bærer nye fag. Disse nye fagene frigjøres kontinuerlig fra E Coli uten å drepe vertscellen. Infeksjonen senker imidlertid veksten av E Coli. dsDNA kan ekstraheres fra bakterielle celler og brukes som vektorer i DNA-kloning.De er kjent som M13 fagvektorer. De kan enkelt manipuleres og brukes på samme måte som plasmidvektorer.

Den inneboende evne til infeksjon av disse M13-fagene tjener som en god kvalifikasjon som skal brukes som vektor i genkloning. Ved utvikling av M13 i en vektor, bør flere elementer inkorporeres i dens genom. De er et gen for lac-repressor-proteinet (lac I), den operator-proksimale regionen av lac Z -genet, en lac-promotor og et multiple kloningssted (polylinker). Når dsDNA av M13 brukes som vektorer, kan den behandles som en plasmidvektor. Imidlertid har bruken av ssDNA M13 fordeler i DNA-sekvensering og stedsstyrt mutagenese.

Siden M13 fagvektor bærer flere kloningssteder i lacZ -regionen, kan rekombinerte vektorer enkelt identifiseres ved den blå / hvite koloniescreening på agarplater som inneholder IPTG og X-Gal. Blå plaketter produsert på platene inneholder ikke de rekombinerte fager. Derfor kan fag med innsatser velges for kloningsformålet.

Figur 02: Bakteriofag M13

Hva er forskjellen mellom YAC og M13 Phage Vector?

- diff Artikkel Midt før tabell ->

YAC vs M13 Fagvektor
YAC er et genetisk utviklet kromosom som har evnen til å bære et stort segment av fremmed DNA og replikere i gjærcellene.	M13 fagvektoren er en viral vektor utviklet av bakteriofag M13 som brukes til å sette frem fremmed DNA i E Coli.
Formål
YACs ble designet for å klone store fragmenter av genomisk DNA i gjær.	M13 fagvektorer brukes til å sette frem fremmed DNA i E Coli.
Sett inn lengde
YACer kan inneholde megabase-størrelse genomiske innlegg (1000 kb - 2000 kb).	Størrelsen på innleggene er omtrent 1 500 bps.
Konstruksjon
YAC DNA er vanskelig å rense intakt og krever en høy konsentrasjon for å generere YAC vektorsystem.	Det skjer via syklisk fotosyntetisk elektronkjede.
Stabilitet
YAC er ustabil.	M13 phages kan enkelt ekstraheres.
Størrelse
Enzymer er større molekyler.	M13 fag er stabile enn YAC.

Sammendrag - YAC vs M13 Fagvektor

YAC er et kunstig konstruert vektorsystem ved bruk av en spesifikk region av gjærkromosom for å sette store segmenter av genetisk materiale til gjærceller. M13 fagvektor er et vektorsystem avledet fra bakteriofag M 13 som bruker E coli som vertsorganismen. Dette er hovedforskjellen mellom YAC og M13 Phage Vector. Begge er like nyttige i rekombinant DNA-teknologi og genkloning.

Referanse:

1. “Vector. "Genetikk-notater - Vector. N. p., n. d. Web. 16. mai 2017. // genetikk-notater. wikispaces. com / Vektor

2. "Gjær kunstig kromosom. "Wikipedia. Wikimedia Foundation, 21. april 2017. Web. 16. mai 2017..

Image Courtesy:

1. "M13B" Av J3D3 - Eget arbeid (CC BY-SA 3. 0) via Commons Wikimedia