Forskjell mellom gelelektroforese og SDS side | Gel elektroforese vs SDS Side
Nøkkelforskjell - Gelelektroforese vs SDS Side
Gelelektroforese er en teknikk som skiller makromolekyler i et elektrisk felt. Det er en vanlig metode i molekylærbiologi å skille DNA, RNA og proteiner fra blandinger i henhold til deres molekylære størrelser. SDS Page er en type gelelektroforese som brukes til å separere proteiner fra en proteinblanding basert på deres størrelser. Gelelektroforese er et begrep som brukes til å referere til den normale teknikken som er anvendt for DNA, RNA og proteinseparasjon mens SDS Page er en en type gelelektroforese. Dette er nøkkelforskjellen mellom gelelektroforese og SDS-side.
INNHOLD
en. Oversikt og nøkkelforskjell
2. Hva er Gel Electrophoresis
3. Hva er SDS-siden
4. Side ved side sammenligning - Gel elektroforese vs SDS Side
5. Sammendrag
Hva er Gel Electrophoresis?
Gelelektroforese er en vanlig teknikk som brukes i laboratorier for å separere ladede molekyler som DNA, RNA, proteiner, etc. fra deres blandinger. En gel blir brukt i gelelektroforese. Det fungerer som en molekylsikt. Det er to typer geler som brukes i gelelektroforese, nemlig agarose og polyakrylamid. Utvelgelse av gel- og gelpreparasjon er viktige faktorer som skal vurderes ved gelelektroforese siden porens størrelse på gelen skal manipuleres nøye for en god separasjon av molekyler gjennom gelelektroforese. Gelelektroforese har et elektrisk felt forbundet til to ender av gelen. En ende av gelen viser en positiv ladning mens den andre enden er negativt ladet.
DNA og RNA er negativt ladede molekyler. Når de er lastet inn i gelen fra den negative enden av gelen og påført det elektriske feltet, migrerer de gjennom gelporene mot den positivt ladede enden av gelen. Migrasjonshastigheten avhenger av ladningen og størrelsen på molekylet. Mindre molekyler migrerer lett gjennom gel porene enn større molekyler. Derfor reiser mindre molekyler lang avstand gjennom gelen, og de større molekylene kjører en kort avstand. For å observere reisen av molekyler på gelen, brukes spesielle typer fargestoffer. Det elektriske feltet påføres i en viss tidsperiode og stoppet for å forhindre tap av molekyler og å holde molekylene i deres reiste posisjoner. Ulike bånd kan observeres i gelen.Disse båndene representerer molekylene av forskjellige størrelser. Derfor er gelelektroforese nyttig for å differensiere molekyler i henhold til deres størrelser.
Gelelektroforese er innarbeidet i forskjellige teknikker som en preparativ teknikk i molekylærbiologi, slik som PCR, RFLP, kloning, DNA-sekvensering, Southern blotting, genomkorting, etc.
Figur 01: Agarosegel elektroforese
Hva er SDS-side?
Natriumdodecylsulfatpolyakrylamidgelelektroforese (SDS Page) er en type gelelektroforese som brukes til å separere proteiner. Når gelelektroforese brukes til å separere proteiner, behøves det spesielle behandlinger da proteiner ikke er negativt ladet som DNA og RNA og ikke migrerer mot den positive enden eller den negative enden. Derfor blir proteiner denaturert og belagt med en negativ ladning før gelelektroforese. Det er gjort med et vaskemiddel som kalles natriumdodecylsulfat (SDS). Gelelektroforeseen som bruker SDS og en polyakrylamidgel for støttemidlet er kjent som SDS Page. Denne teknikken brukes ofte i biokjemi, genetikk, forensikk og molekylærbiologi.
Under SDS Page, blir proteiner blandet med SDS. SDS utvinner proteiner i en lineær form og belegger dem med en negativ ladning proporsjonal med deres molekylmasse. På grunn av den negative ladningen migrerer proteinmolekylene mot den positive ladningsenden av gelen og separerer i henhold til deres molekylmasser. I SDS Page, er polyakrylamid brukt som den faste bærer for gelen. Den faktiske separasjonen av proteiner avhenger hovedsakelig av gelens egenskaper. Derfor bør polyakrylamidgelpreparering nøye utføres og riktige konsentrasjoner av polyakrylamid bør brukes. Polyakrylamidgeler viser høy oppløsning enn agarosegeler. SDS Page anses derfor for en høyoppløselig teknikk for proteinseparasjon.
SDS Page er en type denaturerende gelelektroforese. Den har en stor begrensning i proteinanalyse. Siden SDS denaturerer proteiner før separasjon tillater det ikke deteksjon av enzymatisk aktivitet, proteinbindingsinteraksjoner, proteinkofaktorer, etc.
Figur 02: SDS-side
Hva er forskjellen mellom gelelektroforese og SDS-side?
- diff Artikkel Midt før tabell ->
Gelelektroforese vs SDS Side |
|
| Gelelektroforese er en metode som utføres for å skille makromolekyler ved hjelp av et elektrisk felt. | SDS Page er en høyoppløselig gelelektroforese-teknikk som brukes til å separere proteiner basert på deres masse. |
| Gel Run | |
| Det kan utføres horisontalt eller vertikalt. | SDS-siden kjører alltid vertikalt. |
| Grunnleggende for separasjon | |
| Separasjon skjer i henhold til ladning og størrelse. | Proteinseparasjon skjer i henhold til masse og ladning. |
| Oppløsning | |
| Agarosegelelektroforese har lav oppløsning og polyakrylamidgelelektroforese har en høyere oppløsning | SDS Side har en bedre oppløsning. |
| Denaturering | |
| Gelelektroforese inkluderer både denaturerende og ikke-denaturerende teknikker. | SDS Page denaturerer proteiner før separasjon. |
Sammendrag - Gel elektroforese vs SDS Side
Gelelektroforese er en vanlig teknikk som brukes til separasjon og analyse av DNA, RNA og proteiner basert på deres størrelse og ladning. Det er to hovedtyper av gelelektroforese, nemlig agarosegelelektroforese og polyakrylamidgelelektroforese. Agarose geler brukes hovedsakelig for nukleinsyreseparasjon; Når høyere oppløsning kreves, brukes polyakrylamidgeler. SDS Page er en type gelelektroforese som vanligvis brukes til å separere komplekse blandinger av proteiner. Det regnes som en høyoppløselig proteinseparasjonsteknikk. Dette er forskjellen mellom gelelektroforese og SDS Page.
Referanser:
1. Nowakowski, Andrew B., William J. Wobig, og David H. Petering. "Native SDS-PAGE: Høyoppløselig elektroforetisk separasjon av proteiner med retensjon av native egenskaper, inkludert bundet metallononer. www. NCBI. NLM. NIH. gov. N. p., Mai 2014. Web. 7. april 2017
2. Stellwagen, Nancy C. "Elektroforese av DNA i agarosegeler, polyakrylamidgeler og i fri løsning. "Elektroforese. U. S. National Library of Medicine, juni 2009. Web. 07. april 2017
Image Courtesy:
1. "Gelelektrophoreseapparatur" (CC BY-SA 3. 0) via Commons Wikimedia
2. "DNA-agarosegelelektroforese" ved naturkurs fra Ann Arbor - DNA-lab (CC BY 2. 0) via Commons Wikimedia
